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使用高效液相色谱仪时,不要做以下几种
时间:2020/10/8 16:39:00 来源: 作者: 点击: 次


应用高效率液相色谱时,不必做下列几类

流动相不过虑

因为尘土或一切别的残渣颗粒物会损坏柱塞泵、密封环、气缸套和本产品,因此 挪动看中的一切固态颗粒物都应提早消除。流动相最好是在玻璃器皿中水蒸气蒸馏,常见的方式是过虑。可应用微孔过滤器(0.2μm或0.45μm)泵的通道应联接到砂滤棒(或片)上输液泵过滤装置应常常清理或拆换。

应用后沒有立即高压清洗泵

流动相不可带有一切腐蚀化学物质,带有缓冲剂的流动相不可留到泵中,尤其是在泵终止留宿或更长的状况下假如带有缓冲溶液的流动相留到泵内,因为挥发或泄露,乃至只是因为水溶液的静止不动部位,都是有很有可能溶解细微的盐晶体,这种盐晶体会做为所述固态颗粒物毁坏密封环和柱塞泵因而,必须泵纯净水以彻底清理泵,并且用合适离子交换柱储存和泵维护保养的溶剂(乙醇或乙醇-水用以反相粘接硅橡胶固定不动相)开展拆换。

流动相走空

泵工作中时留意避免 溶剂瓶里流动相耗尽不然空泵运作时也会损坏柱塞泵、汽缸或密封环最后造成泄露。

要是没有流动相位差排出和工作压力命令该怎么办?

泵里很有可能有很多的汽体。这时,能够开启调压阀,使泵以大流量(如5ml/min)运行,排出来汽泡。还可以在泵出入口应用50ml注射针协助提取汽体另一个很有可能的缘故是密封环损坏了,必须拆换。

工作压力和总流量不稳了?

缘故可能是汽泡,必须清除;也可能是逆止阀内有脏东西,能够消除并渗入甲苯中开展超声清洗。有时候在砂滤棒中很有可能存有汽泡,或是被盐或繁育微生物菌种的细颗粒物阻塞,当能够根据超声波去泡除去和浸入在流动看中的砂过滤装置棒时,或是能够将砂过虑棒渗入稀碱(比如2mol/L氰化钠)中,以迅速去除微生物菌种,或是在马上清理以前融解盐。

工作压力为什么过高或过低?

可能是管道阻塞,必须清理工作压力较低的缘故可能是管路泄露逐段查验阻塞或泄露状况。

在梯度洗脱中,因为多种多样溶剂的混和和构成的转变,有一些独特的难题必须充足留意:

在液相色谱中,繁杂试品选用梯度洗脱在同一剖析循环系统中,流动相的浓度值比按一定的流程持续转变,称之为梯度洗脱。因而,依据适合的容量因子K,能够非常好地分离出来出繁杂试品中不一样特性的成分。

梯度洗脱的优势:1.减少剖析周期时间;2.提升 分离出来工作能力;3.峰型获得改进,非常少拖尾;4.提升敏感度。但有时候造成基线漂移。)

梯度洗脱的流动相挑选不善

留意溶剂的混可溶,不混溶的溶剂不可以作为梯度洗脱的流动相一些溶剂可按一定占比混溶,超出不可以混溶,应用时要留意。当混和有机化学溶剂和缓冲剂时,盐晶体还可以沉定,尤其是当应用聚磷酸盐时。

忽视的空缺梯度洗脱

梯度洗脱常用溶剂的纯净度较高,以保证优良的再现性试品剖析前务必开展空缺梯度洗脱,以鉴别溶剂残渣峰,由于弱溶剂中的残渣在离子交换柱聚集后将被强溶剂洗脱用以梯度洗脱的溶剂必须彻底除气,以避免 在混和时汽泡。

忽视了溶剂混和所产生的黏度转变

混和溶剂的黏度通常随构成的转变而转变,因而在梯度洗脱全过程中工作压力通常会产生变化。比如,乙醇和水的比重较小。当他们以同样的占比混和时,黏度提升许多 。这时,柱压约为流动相乙醇或水的二倍因而,应留意避免 梯度洗脱全过程中的工作压力超出输注泵或离子交换柱承担的较大工作压力。

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